PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例3 以玻璃纤维膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟;最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀;混合液转移至装有玻璃纤维的离心柱中,上海益启品牌土壤DNA提取规格。徐汇区FastDNA Spin Kit For Soil土壤DNA提取参数
直接应用于下游实验。多:完美配合自动化核酸提取仪,实现高通量提取。广:多种环境土壤均能有效提取,适用性广,***匹配市面上大多数核酸提取仪和工作站。安:不使用酚、氯仿等有毒试剂,安全环保。PART.02。多重数据表明提取效果。MagBeads FastDNATM Kit for Soil用于提取不同类型土壤DNA,可直接用于PCR、酶切、测序等下游实验。提取不同类型土壤DNA收率及纯度结果:A260/A280比值在1.7~2.0范围视为提取效果良好,A260/A230比值大于杨浦区土壤基因组土壤DNA提取咨询报价实验室用的土壤DNA提取推荐购买什么品牌?
。如果样品中的目的微生物含有比较厚的细胞壁,可能需要额外的破碎裂解。问题4:洗脱的DNA颜色为黄色或棕色怎么办?解决思路:·腐殖酸含量高【1】在洗涤步骤之前,可先用4.5M-5.5M的异硫氰酸胍溶液洗涤1-2次。【2】减少样本用量。问题5:A260/A280比值偏低怎么办?解决思路:·蛋白去除不干净:增加蛋白沉淀离心的次数。·洗涤不干净:增加洗涤次数。问题6:A260/A280比值高怎么办?解决思路:·RNA含量高,可在洗脱之后的溶液中加
更好的纯度,提取效果更稳定。SPINeasy DNA Kit for Soil(5preps)**试用装申请+反馈有奖活动正在进行中,欢迎关注公众号→点击MP产品→试用申请,填写申请信息,我们的工作人员审核后会尽快与您电话联系。划重点!!!添加微信客服:mpbiohelper,填写完整样品反馈记录即可获得惊喜礼品一份!数量有限,快火速申请!MP Biomedicals土壤基因组DNA提取试剂盒系列产品——满足多种提取需求!名称:FastDNA Spin Kit for Soil、SPINeasy Kit for土壤DNA提取保证正规产品——益启生物公司。
实验的时候,有没有遇到过实验结果不符合预期的情况,提取DNA的纯度过低、浓度达不到预期或者是出现弥散现象。***给大家聊一聊一下其他同学遇到的问题,以及MP技术人员给出的解决方案,希望可以帮到大家,在以后的实验中顺顺利利~问题1:土壤样品含水量过高怎么办?解决思路:· 如果土壤样品过湿,可先将样本10,000 x g,离心30s,尽可能多的去除液体。问题2:DNA产量低怎么办?解决思路:· 样本微生物含量低:【1】增加样本量【2】益启生物的土壤DNA提取怎么样?嘉定区FastDNA Spin Kit土壤DNA提取联系电话
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NA基因扩增子测序及分析,研究菌群分布。参考文献2:·样本类型:***种子。·样本粉碎:每管20粒种子,电动组织研磨器配合研磨杵,研磨5min。·样本DNA提取:FastDNA Spin Kit for Soil提取。·下游实验:细菌16S rDNA基因扩增子测序及分析,研究菌群分布。 相关文献:1.Campisano A ,Antonielli L , Pancher M , et al. Bacterial Endophytic Communities in theGrapevine Depend on Pest Management【J】. Plos One, 2014, 9.2.Chen X , Krug L ,Yang H , et a徐汇区FastDNA Spin Kit For Soil土壤DNA提取参数
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